Steriliseringseffektivitetsbekræftelse af autoklaver

Et af de mest essentielle instrumenter i et mikrobiologisk laboratorium er sterilisatoren, hvor autoklaven (højtryksdamp sterilisator) er den mest almindeligt anvendte. Ifølge GB 4789.1-2016 skal laboratorieudstyr regelmæssigt inspiceres og/eller kalibreres (med inspektionsmærker), vedligeholdes og serviceres for at sikre korrekt ydeevne og operationel sikkerhed. Men har din autoklave gennemgået sådanne inspektioner? Og hvis du vil udføre verifikation, hvordan skal du gøre det? I dag opsummerer vi de vigtigste metoder til at verificere steriliseringseffektiviteten af ​​autoklaver.

Bekræftelse af autoklave-steriliseringseffektivitet inkluderer generelt metoder såsom kemisk indikator, maksimalt termometer, selvfremstillet temperaturrør og biologisk indikator. Selvom disse metoder deler lignende principper - bekræfter hovedsageligt, om sterilisatoren når den krævede temperatur under sterilisering - kan du vælge en eller flere baseret på dit laboratoriums specifikke betingelser.

1. Kemisk indikatormetode

Princip: Kemiske indikatorer gennemgår en farve- eller formændring under specifikke temperatur- og tidsforhold. Denne ændring bruges til at bestemme, om steriliseringsparametrene er opfyldt.

Et almindeligt anvendt emne i laboratorier er 3M Autoclave -indikatorbåndet, der ændrer farve efter sterilisering. Båndet er lavet af termosensitive kemikalier, farveudviklere og malingsmaterialer, trykt i et stripmønster på klæbende tape. Det påføres direkte på ydersiden af ​​steriliseringspakken med en minimumslængde på 5 cm. Tryk let på båndet for at sikre god vedhæftning og forsegling. Efter at have været udsat for 121 ° C i 20 minutter eller 130 ° C i 4 minutter, skal de diagonale hvide striber på båndet blive helt sort. Hvis farveændringen er ujævn eller ufuldstændig, betragtes pakken som ikke korrekt steriliseret.

2. Maksimal termometermetode

Princip: Denne metode bruger et kviksølvtermometer, der ikke vender tilbage til en lavere temperatur, når den er opvarmet, svarende til et traditionelt medicinsk termometer. Det angiver den maksimale temperatur, der er nået under sterilisering.

For verifikation skal du placere kviksølvtermometeret inde i en vandfyldt Erlenmeyer-kolbe. Under sterilisering skal du placere kolben i de øverste og nedre sektioner af autoklaven. Efter processen skal du kontrollere, om termometerets læsning matcher den krævede temperatur. Denne metode kan kun verificere temperaturen og kan ikke bekræfte, om steriliseringstidskravet blev opfyldt, så den repræsenterer minimumsstandarden for autoklavverifikation.

3. selvfremstillet temperaturrørmetode

Princip: Denne metode anvender visse kemikalier, der smelter og omkrystalliserer ved specifikke temperaturer, med karakteristiske krystalformer efter afkøling. Disse kemikalier er forseglet i små glasrør og placeres inde i autoklaven. Efter sterilisering undersøges krystalformen for at bestemme, om den korrekte temperatur var nået.

Benzoesyre anvendes ofte med et smeltepunkt på 121–123 ° C, som er på linje med autoklavens standard steriliseringstemperatur. Fast benzoesyre forsegles i små glasrør og anbringes i autoklaven. Efter sterilisering observeres tilstanden for benzoesyren for at bekræfte, om måltemperaturen blev opnået. Ligesom den maksimale termometermetode verificerer denne fremgangsmåde kun temperatur, ikke varigheden af ​​sterilisering.

4. biologisk indikatormetode

Princip: Denne metode bruger ikke-patogene sporer af Geobacillus stearothermophilus som indikatororganismer til at vurdere effektiviteten af ​​termisk sterilisering. Disse sporer er meget varmebestandige med resistens, der ligner den for patogene Clostridium botulinum-sporer, hvilket gør dem egnede indikatorer til verificering af steriliseringseffektivitet.

Biologiske indikatorer fås i tre former: spore-suspensioner, sporstrimler og integrerede spore-og-medium-rør. Disse er typisk placeret på fem steder i steriliseringsbeholderen: fronten, midten og bagsiden af ​​det nedre lag samt midterpunkterne i de øverste og midterste lag. Efter sterilisering inokuleres indikatorerne i Bromocresol Purple-glucose-peptone vand og inkuberes ved 55-60 ° C i 2-7 dage. Hvis mediet forbliver klart og uændret i farve, blev sporer dræbt, hvilket indikerer god sterilisering. Hvis mediet bliver gult og grumset, overlevede sporer, hvilket antyder, at den dårlige steriliseringsydelse. Både spore -suspensioner og sporstrimler følger den samme valideringsproces.

Kommercielle biologiske indikatorrør bruges også ofte i laboratorier. De indeholder geobacillus stearothermophilus sporer og en forseglet glas ampul med vækstmedium. Rørene anbringes i hele steriliseringsbeholderen. Efter autoklavering knuses glas ampulle for at frigive mediet, og røret inkuberes ved 56 ° C sammen med en positiv kontrol. Hvis sterilisering er utilstrækkelig, vil de overlevende sporer vokse og dreje bouillon gul. Hvis sterilisering er effektiv, inaktiveres sporer, og bouillon forbliver lilla.

Bekræftelsesfrekvens

I øjeblikket er der ingen streng national standard med hensyn til hyppigheden af ​​bekræftelse af autoklaveffektivitet. Laboratorier forventes at etablere deres egne verifikationsplaner og overholdes strengt til dem. I betragtning af både brugervenlighed og pålidelighed af resultater anbefaler vi at bruge indikatorbånd i kombination med biologiske indikatorrør, da de tilbyder enkel drift og omfattende verifikation af steriliseringseffektivitet.

Bemærkninger om sterilisering (kræves ikke for nogle importerede fuldautomatiske autoklaver)
Når du bruger en højtryksdampsterilisator, er det vigtigt at udvise al kold luft inde i kammeret, når dampen frigøres. Først efter at al den kolde luft fjernes, hvis udstødningsventilen lukkes. Hvis der forbliver nogen luft, kan trykmåleren indikere det korrekte tryk, men den faktiske temperatur inde i kammeret kommer til kort. Jo mere luft bevaret, jo større er uoverensstemmelsen mellem tryk og temperatur, hvilket potentielt resulterer i ufuldstændig sterilisering. (Dette observeres ofte under steriliseringen af ​​fermenteringsmedier, hvor luftbobler forbliver i små guide -rør - prøver udtømmer den kolde luft mere grundigt.)