Autoklave steriliseringseffekt verifikation

Et af de essentielle laboratorieinstrumenter i et mikrobiologisk laboratorium er sterilisatoren, hvor autoklaver er den mest almindeligt anvendte type. I henhold til GB 4789.1-2016 skal laboratorieudstyr regelmæssigt inspiceres og/eller kalibreres (med passende mærkning), vedligeholdes og serviceres for at sikre operationel ydeevne og sikkerhed. Men gennemgår din sterilisator lignende inspektioner? Hvis en sådan validering er påkrævet, hvordan skal den udføres?

I dag opsummerer vi de vigtigste aspekter af steriliseringseffektivitetsvalidering for autoklaver.

De almindelige metoder til validering af autoklave-steriliseringseffektivitet inkluderer den kemiske indikatormetode, den faste-punkttermometermetode, den selvfremstillede temperaturprobe-metode og den biologiske indikatormetode. Principperne bag disse metoder er ens og fokuserer primært på at verificere, om temperaturen inde i sterilisatoren når det krævede niveau under sterilisering. Afhængig af de specifikke betingelser på laboratoriet kan en eller flere metoder vælges til validering.

1. Kemisk indikatormetode
Princip: Kemiske indikatorer gennemgår farveændring eller deformation, når de udsættes for en specifik temperatur og varighed, hvilket tillader vurdering af, om steriliseringsparametre er opfyldt.

En almindeligt anvendt indikator i laboratorier er 3M Autoclave -indikatorbåndet, der ændrer farve før og efter sterilisering for at indikere effektivitet. Dette bånd er lavet med varmefølsomme kemikalier og farveveloperende midler, der er trykt i striber på et specielt klæbebånd. Båndet skal påføres på ydersiden af ​​pakken med en minimum længde på 5 cm og presses fast for bedre vedhæftning og forsegling. Efter sterilisering ved 121 ° C i 20 minutter eller 130 ° C i 4 minutter, vil de diagonale hvide striber på båndet blive helt sort. Hvis farveændringen er ujævn eller ufuldstændig, har pakken muligvis ikke opfyldt steriliseringsbetingelser.

2. Fastpunkts termometermetode
Princip: Denne metode bruger et kviksølvtermometer, der bevarer den højeste temperatur, der er nået, svarende til et traditionelt klinisk termometer. Det hjælper med at bestemme den maksimale temperatur opnået inde i autoklaven under sterilisering.

Til validering anbringes et kviksølvtermometer i en stor konisk kolbe fyldt med vand. Under sterilisering er kolben placeret i både de øvre og nedre sektioner af autoklaven. Efter sterilisering kontrolleres termometeraflæsningen mod den krævede temperatur. Imidlertid verificerer denne metode kun temperaturen og bekræfter ikke, om steriliseringsvarigheden var tilstrækkelig, hvilket gør den til den mest basale standard for autoklavvalidering.

3. selvfremstillet temperaturprobe-metode
Princip: Denne metode udnytter smeltnings- og omkrystallisationsegenskaber for visse kemikalier, når de udsættes for varme. Ved at forsegle disse kemikalier inde i små glasrør og placere dem i autoklaven, kan krystaldannelse efter sterilisering indikere, om den krævede temperatur blev nået.

Et almindeligt anvendt reagens er benzoesyre, der har et smeltepunkt på 121–123 ° C, hvilket nøje matcher den krævede steriliseringstemperatur. Under sterilisering forsegles fast benzoesyre i et lille glasrør og placeres inde i autoklaven. Efter processen undersøges krystalstrukturen af ​​benzoinsyren for at bestemme, om den krævede temperatur blev opnået.

Ligesom den faste-punkttermometermetode indikerer denne fremgangsmåde kun temperatur og kan ikke bekræfte, om steriliseringsvarigheden var tilstrækkelig.

4. biologisk indikatormetode
Princip: Denne metode bruger ikke-patogene Geobacillus stearotermophilus-sporer som indikatororganismer til at vurdere effektiviteten af ​​varmen sterilisering. Disse sporer er meget modstandsdygtige over for varme og har en termisk resistens, der ligner Clostridium botulinum -sporer, hvilket gør dem til en pålidelig reference til evaluering af, om autoklaven opfylder steriliseringskravene.

Biologiske indikatorer findes i tre former:

Spore -suspensioner
Spore strimler
Sporestrimler kombineret med et kulturmedium (biologiske indikatorrør)
De biologiske indikatorer er typisk placeret på fem steder inde i steriliseringskammeret:

Lavere niveau: foran, midten og tilbage
Øvre niveau: Center
Efter sterilisering inokuleres indikatorerne i Bromocresol-lilla-glucosepeptonvand og inkuberes ved 55-60 ° C i 2-7 dage:

Hvis kulturmediet forbliver klart og uændret i farve, er sporer dræbt, hvilket indikerer effektiv sterilisering.
Hvis mediet bliver gult og grumset, har sporer overlevet, hvilket betyder, at steriliseringsprocessen var ineffektiv.
Den samme valideringsmetode gælder både spore -suspensioner og sporstrimler.

Mange laboratorier bruger også kommercielle biologiske indikatorrør, der fungerer på samme måde som spore -suspensioner og strimler. Disse rør indeholder G. stearothermophilus sporer sammen med en glas ampul af kulturmedium. Efter autoklavering knuses glasampulen inde i røret for at frigive kulturmediet, og røret inkuberes ved 56 ° C, med en positiv kontrol inkluderet.

Hvis steriliseringen var ineffektive, vil levedygtige sporer vokse og dreje bouillon gul.
Hvis sterilisering var vellykket, inaktiveres sporer, og bouillon forbliver lilla.
Frekvens af autoklavvalidering
I øjeblikket er der ingen strenge reguleringsstandarder, der definerer, hvor ofte autoklaver skal valideres. Laboratorier bør dog etablere deres egen valideringsplan og strengt overholde den.

For let drift og pålidelig validering anbefales kemisk indikatorbånd og biologiske indikatorrør stærkt. Disse metoder er brugervenlige og giver en omfattende vurdering af steriliseringseffektivitet.

Nøgleovervejelser til autoklavering
(Nogle fuldautomatiserede importerede autoklaver kræver muligvis ikke manuel udluftning)

Når du bruger en autoklav, er det vigtigt at fjerne kold luft fra kammeret, mens du introducerer damp. Udstødningsventilen skal forblive åben, indtil al kold luft er udvist, hvilket sikrer en jævn temperaturfordeling inde.

Hvis der forbliver nogen luft inde i kammeret, kan trykmåleren indikere det korrekte tryk, men den faktiske temperatur vil være lavere end forventet. Jo mere resterende luft er, jo større er uoverensstemmelsen, hvilket fører til ufuldstændig sterilisering.

(For dem, der støder på luftbobler i små rør, når sterilisering af gæringsbaserede medier, prøv at øge luftvakueringen for at forbedre resultaterne.)